冷胁迫是后果农农物出产量的核心环镜试练之四。钙依耐性蛋白酶激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）手机信号传导到上皮细胞并更改密码对苦难积极响应的根本转换成分，但其国家宏观调控系统尚不明白。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷酸性反应修饰语位点检查服务。

国外英文标题文字：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文版标题格式：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

客基层单位：浙江大学

调查原料：番茄

拜谱打造能力：磷碱化修饰语位点查重

研究分析工作思路：

一、调查效果

1、CPK27在温度过低胁迫下理解调涨，然后资料根系耐寒性性

已往探析确认，CPK27在冷胁迫状况下呈现调涨。为认证这样最终结果，本段中作著选用CPK27的两根敲除突变的系（cpk27 #2，#6）采取耐冷性各种测试，看到CPK27的转录层次面显著性性少于参考组（图1a-b）。在CPK27呈现被调节的藤本植物中，对耐冷性的不断强化的功效显著性性变弱。进几步的亚肿瘤细胞膜品牌定位与解锁探析确认，冷胁迫促进会CPK27向肿瘤细胞膜核积攒，并不断强化其磷过酸层次面（图1 f）。免疫性痕印定性分析进几步确认冷胁迫分析 CPK27 在核内核蛋白丰度加强、胞内丰度极大减少，外源CaCl₂外理可个部分恢复正常cpk27的冷敏感性表型，确认CPK27依靠Ca²⁺数字信号引领的功效。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖于办法激发番茄耐寒性性

2、CPK27经过房产调控黄大环内酯聚合前提条件调理低温环境神经损伤

转录组测序成果表明，CPK27的过把你想表达方式出来可观上涨黄吩噻嗪生物制品结合相关人类遗传基因，如CHS、CHI和FLS等，互相黄吩噻嗪细胞代谢通道可观生物富集。而CPK27变异体中这个人类遗传基因把你想表达方式出来再降，提示信息CPK27利用有助于黄吩噻嗪结合帮茎叶调理常温胁迫带来了的空气氧化压力差（图2a-e）。

图2 RNA-seq阐述CPK27房产调控的冷异常表观遗传

3、HY5是CPK27介导的抗寒信号灯环路中的重中之重靶标

为安全验证 CPK27 与 HY5 的之间意义，作著一开始参与了酵母粉双混种（Y2H）试验，结论得知俩者会出现之间意义（图3a）。双碳原子荧光专一性（BiFC）试验进步得出结论CPK27 与 HY5 在细胞系核内会发生之间意义（图 3b）。然后经过免疫系统共积淀等枝术，知道HY5与CPK27在藤本植物自身会出现之间意义，且俩者的之间意义都具有钙阳离子（Ca²⁺）依赖关系性（图 3c）。除外，在Co-IP试验的淀粉酶截取前增加冷胁迫治理，结论提示冷胁迫可资料HY5与CPK27的之间意义（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷硝化作用其重要的位点

4、CPK27磷碱化HY5怎强其转录特异性，有助于黄吩噻嗪染色体理解

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷硝化作用突显位点判断，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷过酸HY5并不断增强其比较稳定量分析

5、CPK27 在类黄酮生态学结合环路中意义于HY5的品牌进入校园市场

总体什么是基因展示和消化吸收物介绍最终（图5），CPK27在冷胁迫没有响应工作中功能于HY5的中上游，确认监测 HY5 介导的类黄酮生物制品提炼通道引响植被耐热性。

图5 CPK27使用于HY5品牌进入校园市场

二、原创文章个人总结

由此可见所诉，中心句设计印证CPK27磷硝化作用掩盖HY5血清，成功激活类黄酮合并经过，推动氧化作用物东西积攒，以求增強抗冻实力。该设计说明了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联宏观调控制度化（图6），印证CPK27介导的HY5磷硝化作用是无线连接钙的信号与次生产生防卫的重要关键步骤，为认识树木苦难运行微信网络供应了新视距。

图6 CPK27-HY5摸块提升常绿植物接受冷胁迫的措施

三、拜谱个人心得体会

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的胆固醇质组学、装饰胆固醇质组学、分解组学、转录组学等几组学的产品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

基准学术论文：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134